羊布魯氏菌病免疫操作技術規范

來源:新疆自治區畜牧獸醫局 發布日期:2019-12-30 閱讀:533

??言

本標準按照 GB/T 1.1-2009《標準化工作導則 第1部分:標準的結構和編寫》給出的規則起草。

本標準由烏魯木齊市動物疾病控制與診斷中心提出。

本標準由新疆維吾爾自治區畜牧廳歸口。

本標準起草單位:烏魯木齊市動物疾病控制與診斷中心、烏魯木齊市達坂城區畜牧獸醫站、新疆兵團畜牧獸醫工作總站、石河子大學。

本標準主要起草人:蔡擴軍、李愛巧、馬衛平、王濤、郭亞軍、楊小亮、喬軍、李惠、施遠翔、阿依努爾﹒何孜爾、楊啟元、李巖、魏學峰。


羊布魯氏菌病免疫操作技術規范

1 范圍

本標準規定了羊布魯氏菌病(以下簡稱羊布病)免疫操作的術語和定義、疫苗使用過程中免疫效力保證、人員防護、免疫接種、免疫抗體監測的技術要求。

本標準適用于羊布魯氏菌病的免疫工作。

2 規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。

GB 16548  病害動物和病害動物產品生物安全處理規程

GB/T 18646 動物布魯氏菌病診斷技術

3 術語和定義

下列術語和定義適用于本文件。

3.1  

批次 batch

具有相同代碼、組成均一的全部疫苗。

3.2  

劑量 dosage

標簽上標定的特定年齡羊,經特定免疫途徑,一次接種疫苗的使用量。

3.3  

效力 potency

根據生產商建議使用生物制品所產生的特異的免疫保護能力。

3.4  

注射免疫 immunization by injection  

將疫苗(菌苗)通過肌肉、皮下、皮內等途徑注入機體,使之獲得免疫力的方法。

3.5  

口服免疫 oral immunization

將疫苗稀釋灌服或拌入疫苗的飼料喂給動物使之獲得免疫的方法。

3.6  

飲水免疫 immunization by dringking

將疫苗或稀釋的疫苗,通過飲水輸入動物體內使之獲得免疫力的方法。

3.7  

點眼免疫  immunization via conjunctiva sac

將疫苗或稀釋的疫苗滴入動物結膜囊內,使動物獲得免疫力的方法。

3.8  

滴鼻免疫 immunization by nostril-droping

將疫苗或其稀釋物滴入動物鼻腔,使之獲得免疫力的方法。

3.9  

消毒壓塵 disinfection and dustproof

是指通過噴霧的方式消毒,以減少空氣中飛揚的塵土,消滅塵土中攜帶的病原微生物,達到消毒和降低塵土顆粒的數量,防止病原微生物通過附著在塵土上被人吸入而感染疫病。

3.10  

免疫監測 immune surveillanc

抽檢免疫動物群體的抗體水平,以監控群體的免疫狀態,為實施計劃免疫和增強免疫提供技術依據。

3.11  

應免羊 sheep should be immunized

3月齡以上的臨床健康羊(不包括種羊、懷孕羊、奶山羊及28d內屠宰上市的育肥羊)。

3.12  

抗體陽轉率 seroconversion rate

家畜布病疫苗免疫后21d30d進行抽樣,采用虎紅平板試驗,檢測出抗體陽性數量占抽樣數量的百分比例。

4 免疫效力保證

4.1 疫苗的選擇

4.1.1 根據當地羊布病主要流行菌型,選擇匹配的疫苗進行預防接種。

4.1.2 根據飼養羊的數量,準備足夠完成一次免疫接種所需要的經國家批準生產、同一廠家、同一批次的疫苗。

4.2 疫苗的種類

農業部批準生產的疫苗。

4.3 疫苗的運輸和貯藏

4.3.1 夏季疫苗應采用冷藏運輸。

4.3.2 疫苗貯藏溫度參照不同疫苗各自的說明書執行。

4.4 疫苗使用要求

4.4.1 應免羊的要求

應免羊臨床表現健康。種羊、乳用羊不免疫。

4.4.2 疫苗的檢查

疫苗使用前,要仔細檢查外包裝是否完好,是否真空,標簽是否完整,包括疫苗名稱、生產廠家、免疫劑量、生產批號、批準文號、保存日期或失效日期。如出現瓶蓋松動,漏氣、疫苗瓶破損、超過保質期、色澤與說明不符、物理性狀有異常的疫苗,不得使用。

4.4.3 保定要求

羊只保定牢固,使疫苗有效進入到羊體內。

4.4.4 免疫密度

    應免羊全部實施免疫,不得漏免。

4.4.5 接種器具的準備

4.4.5.1 點眼器、滴鼻器:可使用玻璃滴管(帶膠皮吸頭)、塑料滴管或專用點眼瓶。

4.4.5.2 接種針頭:接種時一般應使用9號針頭,一羊一針頭,避免交叉污染。

4.4.5.3 注射器:組裝好的注射器和針頭必須吻合無隙,潔凈,暢通,不能漏液。

4.4.6 對免疫場地要求

在免疫前對免疫圈舍地面噴灑消毒水,滅菌、壓塵。

5 人員防護

5.1 工作人員經過羊布病防護知識培訓后方能上崗工作,最好為成立的專業布病防控隊隊員。

5.2 羊布病免疫時工作人員要使用全封閉式連續注射器或封閉式投藥箱。

5.3 羊布病檢測陽性及有外傷的人員不能從事羊布病免疫工作。

5.4 實施羊只保定和免疫的工作人員要做好人員防護工作。在保定和免疫中必須全程穿戴一次性防護服、膠靴,佩戴N95口罩、護目鏡、帽子、一次性乳膠手套,在當日免疫工作結束后,對重復使用的膠靴、護目鏡用消毒液浸泡消毒,對于一次性防護服、N95口罩、帽子、手套等進行焚燒或深埋處理。

5.5 參與保定和免疫的人員在免疫過程中,未經嚴格消毒,嚴禁接聽電話、吸煙、飲食等與免疫工作無關的行為。

5.6 為安全起見,保定和免疫人員可以選擇藥物預防,連續用藥3d~7d。

5.7 如果注射疫苗時針頭扎破人皮膚,應立即用潔凈手擠壓傷口,酒精棉球擦拭消毒;如果出現疫苗和人的眼睛、皮膚直接接觸等意外緊急情況,應立即用大量水清洗,并對皮膚進行消毒處理。建議服用藥物3d~7d以預防感染布病。

5.8 工作人員操作完后,對手、皮膚裸露部分清洗、消毒。

5.9 出現波浪熱、乏力、關節疼等疑似布病臨床癥狀的人員要及時到當地衛生部門做布魯氏菌病檢測。

6 免疫接種

6.1 疫苗的稀釋

疫苗稀釋時要無菌操作,稀釋液的劑量與免疫頭份相匹配,稀釋液要使用專用的稀釋液或滅菌的生理鹽水。稀釋疫苗時,先把少量的稀釋液加入疫苗瓶中,待疫苗溶解后,再注入稀釋液的瓶子內,用稀釋液把原疫苗瓶反復沖洗干凈。或使用家畜布病疫苗連續注射器或專用灌服投藥箱等,接種前將疫苗充分混合均勻,疫苗稀釋后在2h內用完。

6.2 具體免疫接種操作方法

6.2.1 皮下注射法

羊站立保定,注射部位宜選擇在肩前部,局部消毒,將皮膚提起,針頭與皮膚呈45°角,朝遠離頭部的方向刺入,慢慢將疫苗注射皮下。

6.2.2 肌肉注射法

羊站立保定,注射部位宜選擇在頸部上緣下1/3處,局部消毒,針頭朝后方與皮膚表面呈45°角深度進針。

6.2.3 結膜點眼免疫法

    羊站立保定,使用專用滴注器在羊的結膜囊上方滴入稀釋好的疫苗。

6.2.4 口服免疫

羊站立保定,將布病疫苗稀釋,使用灌服投藥箱按照不同疫苗各自的說明書規定菌量灌入羊口;或將疫苗混入飼料中,由羊自由采食。

6.3 接種方法的選擇

接種方法均按不同疫苗各自的說明書規定操作。

6.4 接種劑量及免疫期

參照不同疫苗各自的說明書進行。

6.5 免疫接種時間

6.5.1 常規免疫

對于當年的羔羊:3月齡以上即可免疫;對于規模羊場,在母羊產后1個月或配種前30d進行免疫;對于散養戶,一般在每年4~8月份配種前或轉至夏牧場前進行集中免疫。

6.5.2 補免

在布病免疫期間懷孕的羊,在產后1個月實施補免;不足3月齡的羔羊足齡后實施補免;對免疫背景不清楚的應免羊實施補免。

6.6 接種器具及廢棄物的無害化處理

6.6.1 封閉式家畜布病疫苗連續注射器、針頭、家畜布病專用灌服投藥箱和稀釋藥瓶等接種器具應濕熱高壓滅菌或用潔凈水煮沸15min;不能使用濕熱高壓滅菌或煮沸條件的接種器具使用化學方法消毒,必須使用清水徹底清洗干凈。

6.6.2 免疫中使用完的疫苗瓶、滴瓶、未用完的疫苗以及其他用具嚴格按照GB 16548的規定進行集中消毒后再做焚燒或深埋等無害化處理。

6.7 接種記錄 

疫苗接種時應做好記錄。免疫記錄應包括羊耳標號、品種、性別、年齡、接種時間、接種地點、免疫疫苗種類、劑量、疫苗生產廠家、批次等項目,確保免疫時間、使用疫苗種類等信息準確詳實、可追溯。

6.8 免疫前后注意事項

6.8.1 免疫前后3d禁止使用抗生素和環境消毒藥物或含有抗生素添加劑飼料和發酵飼料;羊只免疫實施前、后3d禁止藥浴。

6.8.2 免疫時通常先進行羊的布病免疫,在免疫7d后方可進行其他細菌病活疫苗或滅活疫苗的免疫;如果先免疫了其他細菌病活疫苗的,在免疫15d后方可進行布病免疫。對于健康狀況較好的羊群,亦可以將口蹄疫、布病同時分點注射,或將小反芻獸疫和布病疫苗同時分點注射。

6.8.3 免疫后的羊3d內不要遠距離放牧。

6.8.4 免疫后的羊28d內禁止屠宰上市。

6.8.5 免疫后死亡的羊嚴格按照GB 16548的規定進行無害化處理。

 

7  免疫抗體監測

免疫接種后21d30 d進行監測,采樣數按相關規定抽樣,在早晨喂飼前或停食8 h后,頸靜脈采血5 mL,分離血清備檢。按照GB/T 18646的虎紅平板凝集試驗(見附錄A)進行監測。抗體陽轉率達到70%以上即為合格,否則予以加強免疫。

 

A  

A           

附 錄 A
(規范性附錄)
虎紅平板凝集試驗

A.1 材料準備

A.1.1 抗原、標準陽性血清、陰性血清由制標單位提供,按說明書使用。

A.1.2 受檢血清應新鮮,無明顯蛋白凝塊,無溶血和無腐敗氣味。

A.1.3 潔凈的一次性虎紅平板反應紙,或潔凈的玻璃板,其上劃分成4  cm2的方格。

A.1.4 吸管或可調式單道移液器,適于滴加0.03 mL

A.1.5 平板凝集試驗混勻器、移液器吸嘴、牙簽或火柴桿,供攪拌用。

A.2 操作方法

A.2.1 將一次性虎紅平板反應紙上各孔(或玻璃板上各格)標記受檢血清號,然后加相應血清0.03mL

A.2.2 在受檢血清旁滴加抗原0.03 mL

A.2.3 用吸嘴或牙簽類小棒攪動血清和抗原使之混合,形成直徑約2cm的液體反應區,再雙手拿起虎紅平板反應紙板或玻璃板稍微來回輕晃數次。注意每份血清使用一個吸嘴或牙簽。

A.2.4 每次試驗應設陰、陽性血清對照。

A.3 判定

A.3.1 在陰、陽性血清對照成立的條件下,方可對被檢血清進行判定。

A.3.2 受檢血清在22℃±2℃條件下于4 min內出現肉眼可見不同程度的顆粒狀或絮狀的凝集現象者判為陽性(),無凝集現象,呈均勻粉紅色者判為陰性()

B